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    酶elisa试剂盒在使用时常采用的方法有哪些呢

    发布时间: 2021-08-25  点击次数: 700次
       酶elisa试剂盒应快速准确地使用,时间应控制在15分钟以内。如果样品量大,可分几次完成实验,或将样品溶液置于预混合微孔板中,用多道移液管快速移走。吸收相同试剂后,可将试剂倒入V形取样罐中,并用多通道移液管快速取出。将一次性PE手套放在取样罐上,然后倒入试剂进行检测,这样可以保证试剂的完整性,不会被污染。更换取样罐中的一次性手套后,可使用下一种试剂。
      酶联免疫吸附试验(ELISA)作为主要的生物技术,广泛应用于样品抗原和抗体的免疫检测,已成为一种医学诊断工具。基本原理是在测定过程中,被测样品与固相载体表面的抗原或抗体反应,通过洗涤将固相载体上形成的抗原抗体复合物与溶液中的其他物质分离,然后加入酶标记的抗原或抗体,它也通过反应结合在固相载体上。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成有色产物,产物的量与样品中待检测目标物质的量直接相关,因此可以根据颜色的深度进行定性或定量分析。
      酶elisa试剂盒在使用时常采用以下这些方法:
      1)直接法:将抗原直接固定在固相载体上,加入酶标一抗,即可测定抗原总量。该方法步骤短,无需使用二级抗体,避免了相互作用。
      2)间接法:间接法是检测抗体的常用方法。其原理是利用酶标抗抗体(抗人免疫球蛋白抗体)结合固相抗原检测待测抗体。
      3)双抗体夹心法:分别使用针对抗原分子上两种不同抗原决定簇的单克隆抗体作为固相捕获抗体和酶标记检测抗体。它适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,如血浆中的细胞因子,但不适用于测定半抗原和小分子单价抗原。同样,还有一种双抗原夹心法来测量抗体。
      4)竞争法:由于小分子抗原或半抗体导致夹心法缺少两个以上位点,不能采用双抗体夹心法测定,可采用竞争法模式。当难以去除抗原材料中的干扰物质或获得足够纯化的抗原时,该方法可用于检测特异性抗体。
      好了,以上便是关于酶elisa试剂盒的相关内容介绍了。