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    小鼠elisa kit的处理方法以及注意事项说明

    发布时间: 2021-10-26  点击次数: 146次
       小鼠elisa kit的处理方法有哪些呢?今天我们来详细讲解一下!
      纯化的小鼠C-反应蛋白(CRP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入C-反应蛋白(CRP),再与HRP标记的C-反应蛋白(CRP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的C-反应蛋白(CRP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠C-反应蛋白(CRP)的含量。
      elisa属于固相免疫分析,抗原和抗体的结合只发生在固相表面。以抗体包被的三明治法为例,添加到板孔中的抗原不具有固相抗结合的平等机会。只有靠近孔壁的一层溶液中的抗原与抗体直接接触。这是一个逐渐平衡的过程,因此需要扩散才能达到反应的终点。随后添加到固相抗原的酶标记抗体的结合也是如此。
      不管你对实验在懂,了解相关注意事项那是很有必要的,这不仅可以培养我们养成好的实验习惯,还可以减少问题的。下面给大家讲述一下小鼠elisa kit使用注意事项。
      1、严格按照规定的时间和温度进行温育。所有试剂都须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
      2、洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
      3、消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
      4、底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
      5、避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
      6、在储存和温育时避免强光直接照射。
      7、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
      8、包括小鼠elisa kit在内的任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
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