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    ELISA操作要点:ELISA实验18条通用规则

    发布时间: 2023-06-03  点击次数: 793次

    ELISA操作要点:ELISA实验18条通用规则

    ELISA实验操作所要求的条件是比较严格的,无论是对实验的硬件条件还是对实验的操作人员的技术要求,都是如此。下面所提到的就是一些在进行ELISA实验时所要注意的一些问题。
    ELISA实验18条通用规则
    1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但最好有专业人员进行矫正。
    2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
    3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
    4、实验时,要使底物避光保存。
    5、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
    6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
    7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
    8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
    9、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
    10、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻di。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
    11、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
    12、底物是光敏感的,要在临用前现配。
    13、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
    14、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
    15、待检样品要澄清,否则会影响结果。
    16、温浴时间应遵守试剂盒规定。
    17、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。
    18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。