培养基采用化学成分未知或不全知的天然有机营养物质配制而成。常用的天然有机营养物质有马铃薯、小麦、大豆粉、高粱粉、薯类、胡萝卜、米糠、麸皮、各种秸秆、木屑、甘蔗渣、棉籽壳、豆腐渣、酒糟、禽畜粪等。其营养齐全,取材容易,价格低廉,配制方便,是培养菌种和栽培生产理想的产品。配制时宜采用新鲜的材料,秸秆要切短,壳粒需粉碎。
影响灭菌的因素很多,除了杂菌的种类和数量、灭菌温度和时间长度外,还取决于:
1、营养物质的维持
当微生物在湿热灭菌中被杀死时,营养成分也受到一定程度的破坏,尤其是氨基酸和维生素。比如在121℃下仅20分钟,59%的赖氨酸、精氨酸等碱性氨基酸被破坏,还有相当数量的蛋氨酸和色氨酸也被破坏。在热量的作用下,一些营养物质可能会因热量而相互反应,导致原有的营养物质发生变化,从而影响质量。
2.微生物的耐热性
细菌孢子热阻大,灭菌所需时间取决于将细菌孢子减少到规定数量所需的时间。
3.pH值
pH值对微生物的耐热性影响很大。当pH值在6.0-8.0之间时,微生物死亡的可能性小。酸碱度越低,所需的时间越短。
4.颗粒
小颗粒容易杀菌,大颗粒难杀菌。含有少量较大颗粒和粗纤维的介质可以通过粗过滤去除(这不应影响介质的质量)。结块会导致灭菌不*。
5.泡沫
泡沫中的空气形成隔热层,使热量难以渗透进去,杀死杂菌。
现代细胞培养基通常包含70至100种成分,数百种成分的选择以及每种成分都可以从多种渠道来源获得。这导致了错综复杂的供应商网络和可能的变异性。考虑到这种复杂性,我们还需要从不同角度对培养基生产稳定性进行控制,并完善供应管理网络。