小鼠elisa kit试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中小鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)的含量。
实验原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并进行洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
优势:
灵敏度:有二层含义,1)为试剂检出被检物质的低量的能力;2)为试剂对大量样品中阳性检出的能力。
特异性:常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应,使测定结果升高,可能导致假阳性,所以交叉反应是评价其质量的关键指标。
精度:ELISA试剂一般指其批内CV%,其值应小于15%;定量试剂应同时考察线性范围。
准确度:通过添加回收实验进行评价。
简便性:指在不影响试剂的前三项指标的前题下,实验和测定步骤越少越好,在定性实验中结果判断简单明了,定量试验结果计算也应简单。
安全性:指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。
经济性:试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本,而市场价格比较合理。