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    使用胎牛血清前是否需要进行离心操作呢?

    发布时间: 2022-10-24  点击次数: 59次
      血清的质量对实验成败起着关键性作用,但血清使用不当也可能会导致血清质量下降,造成细胞培养效果不理想。来自新西兰的进口胎牛血清很珍贵,大家在血清使用时怎样确定血清使用浓度?
      
      这个只能通过测试了。原则上血清添加量不要太多,通常分为5%、10%、20%几档。部分细胞原代提取时会使用20%血清,大部分细胞正常培养时会使用5%~10%的血清浓度。至于某一株细胞适应什么样的血清浓度,还需要根据细胞特性、实验目的做测试和调整。
      
      血清使用前需要离心吗?这个问题有以下两种可能:
      
      其一,因为血清融解后有“絮状物”析出。
      
      如果没有出现其他异常情况,或者血清只是用于细胞培养,那么*没有必要离心去除。我们知道血清析出的“絮状物”主要是血纤蛋白,其在血清中含量很高,而且高度不溶,在血清冻融过程中很容易析出,但它也是*无害的,甚至能促进细胞生长。
      
      另外,它还增强了胎牛血清的黏性,为细胞提供了额外的机械缓冲。在其析出过程中,会粘附培养体系中其他成分,离心去除,反而会损失营养成分。
      
      其二,实验要求纯净的培养体系。
      
      培养的细胞需要进一步鉴定,如免疫荧光、流式、共聚焦拍照等,细胞表面如果有黏性较强的血纤蛋白,势必会影响效果。
      
      那么,建议400g离心5min即可。如果需要进行精密实验,如分离外泌体等,那么就需要至少100000g离心1.5h以上。
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