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使用胎牛血清前是否需要进行离心操作呢？
发布时间： 2022-10-24 点击次数： 708次血清的质量对实验成败起着关键性作用，但血清使用不当也可能会导致血清质量下降，造成细胞培养效果不理想。来自新西兰的进口胎牛血清很珍贵，大家在血清使用时怎样确定血清使用浓度？这个只能通过测试了。原则上血清添加量不要太多，通常分为5%、10%、20%几档。部分细胞原代提取时会使用20%血清，大部分细胞正常培养时会使用5%～10%的血清浓度。至于某一株细胞适应什么样的血清浓度，还需要根据细胞特性、实验目的做测试和调整。血清使用前需要离心吗？这个问题有以下两种可能：其一，因为血清融解后有“絮状物”析出。如果没有出现其他异常情况，或者血清只是用于细胞培养，那么*没有必要离心去除。我们知道血清析出的“絮状物”主要是血纤蛋白，其在血清中含量很高，而且高度不溶，在血清冻融过程中很容易析出，但它也是*无害的，甚至能促进细胞生长。另外，它还增强了胎牛血清的黏性，为细胞提供了额外的机械缓冲。在其析出过程中，会粘附培养体系中其他成分，离心去除，反而会损失营养成分。其二，实验要求纯净的培养体系。培养的细胞需要进一步鉴定，如免疫荧光、流式、共聚焦拍照等，细胞表面如果有黏性较强的血纤蛋白，势必会影响效果。那么，建议400g离心5min即可。如果需要进行精密实验，如分离外泌体等，那么就需要至少100000g离心1.5h以上。- 下一篇：酶elisa试剂盒的基本原理
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