Sigma:C2399-1.5KU,间质胶原酶VII,cas:C2399-1.5KU
属性:
质量水平:200
无菌性:sterile-filtered
形式:lyophilized powder
specific activity:≥4 FALGPA units/mg solid
≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)
纯化方式:chromatography
溶解性:TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C
储存温度:−20°C
应用:
胶原酶已用于动脉组织的制备,用于晚期糖基化终产物 (AGE) 的研究。该酶还与其他蛋白酶一起使用,用于人体肿瘤、小鼠肾、人脑、肺上皮等多种组织的解聚。在肝脏和肾脏灌注研究、胰腺的消化和非实质肝细胞的分离中也有效。
来自组织溶梭菌的胶原酶已被用于:
1.诱发小鼠脑出血(ICH)
2.消化3D胶原蛋白凝胶以进行免疫荧光分析
3.引起小鼠局灶性血液外渗和出血
生化/生理作用:
有效地从组织中释放细胞需要胶原酶和中性蛋白酶的共同作用。每摩尔酶用 4 克原子钙 (Ca2+) 激活胶原酶。一般认为培养滤液至少含有 7 种不同的蛋白酶,分子量范围为 68-130 kDa(zui适用 pH:6.3-8.8)。该酶识别序列-R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-,其中 X 是最常见的中性氨基酸。
组织溶梭菌包含两类胶原酶。梭菌胶原酶比哺乳动物胶原酶更高效。它在胶原三螺旋中的多个裂解位点进行裂解。梭菌胶原酶可参与气体坏疽中的细菌入侵。
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
单位定义:
一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸,5小时,pH7.4,37℃,在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白,产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时,pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分钟水解1.0 μmole BAEE。
制备说明
由 VII (C0773) 型制备。在 37℃ 下,将 0.05-0.1 mg 胶原酶溶于 1 mL 含 0.36 mM 氯化钙 (TESCA) 的 50 mM TES 缓冲液 (pH 7.4) 中,制备贮备液。
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