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Sigma试剂:间质胶原酶IV,C1889-50MG

Sigma试剂:间质胶原酶IV,C1889-50MG

简要描述:
Sigma试剂:间质胶原酶IV,C1889-50MG,CAS: 9001-12-1
属性:
质量水平:200
无菌性:sterile-filtered
形式:powder
specific activity:≥125 CDU/mg solid
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
分子量:68-130 kDa
适用性:release of physiologically ac

更新时间:2021-07-12

访问量:70

厂商性质:代理商

产品品牌:sigma

产品价格:937.58

Sigma试剂:间质胶原酶IV,C1889-50MG,CAS: 9001-12-1

属性

质量水平200

无菌性sterile-filtered

形式powder

specific activity≥125 CDU/mg solid
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

分子量68-130 kDa

适用性release of physiologically active rat hepatocytes tested

特色行业Diagnostic Assay Manufacturing

储存温度−20°C

一般描述

溶组织梭菌含有两种胶原酶,可剪切胶原酶三螺旋不同的切割位点。切割效率比哺乳动物胶原酶更高。梭菌胶原酶与气性坏疽的细菌侵袭有关。

应用

胶原酶已被用于制备动脉组织,用于研究晚期糖基化终产物(AGE)。该酶还与其他蛋白酶一起用于人肿瘤、小鼠肾、人脑、肺上皮和许多其他组织的解聚。它在肝脏和肾脏灌注研究,胰腺消化和非实质肝细胞的分离中也是有效的。当测试该酶是否适合释放肝细胞时。对于每只大鼠肝脏,胶原酶以约 1mg/mL 使用,总体积为 100mL

胶原酶(源于溶组织梭菌)用于解离组织样本,如脾脏和睾丸组织。

生化/生理作用

从组织中有效释放细胞需要胶原酶和中性蛋白酶的作用。胶原酶被每克摩尔酶 4 克原子钙(Ca2+)活化。培养滤液被认为含有至少 7 种不同的蛋白酶,分子量范围为 68-130 kDa(最适 pH 值:6.3-8.8)。该酶通常用于消化组织样品中的结缔组分以释放单个细胞。胶原酶治疗可导致一些细胞死亡。通常,用于消化的浓度为 0.1 5mg/mL。反应持续时间从 15 分钟到几小时不等,这使得能够有效地解离细胞而不会导致过多的细胞死亡。具有钙和 BSA Krebs Ringer 缓冲液是优选的,并且 Zn2+ 是其活性所必需的。

每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-NNN′,N′-四乙酸,β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。

注意

根据提供,该产品在 -20°C 下,可稳定保存一年。在 37℃50℃ -20℃ 下,30 天内 FALGPA 或蛋白酶活性没有损失。如果以等分试样(10mg/mL)快速冷冻,并且在 -20℃ 下冷冻,则粗胶原酶的溶液是稳定的。进一步的冻融循环会损坏溶液。 当在冰上保持时,该产品在 7 小时内保持 100% 活性。

单位定义

一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸,5小时,pH7.4,37℃,在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白,产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时,pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分钟水解1.0 μmole BAEE

制备说明

IV 型(C5138)制备。可以通过在 37℃ 下,将 0.05-0.1mg/mL 胶原酶溶解在含有 0.36mM 氯化钙(TESCA)(pH 7.4)的 50mM TES 缓冲液中来制备储备溶液。该产品还含有梭菌蛋白酶,非特异性中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。

 

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