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Sigma:间质胶原酶IA,C9891-25MG

Sigma:间质胶原酶IA,C9891-25MG

简要描述:
Sigma:间质胶原酶IA,C9891-25MG,CAS: 9001-12-1
属性:
质量水平:200
形式:essentially salt-free, lyophilized powder
specific activity:≥125 CDU/mg solid
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
分子量:68-130 kDa
溶解性:TESCA buffer (5

更新时间:2022-08-15

访问量:162

厂商性质:代理商

产品品牌:sigma

Sigma:间质胶原酶IA,C9891-25MG,CAS: 9001-12-1

属性

质量水平200

形式essentially salt-free, lyophilized powder

specific activity≥125 CDU/mg solid
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

分子量68-130 kDa

溶解性TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble

特色行业Diagnostic Assay Manufacturing

运输wet ice

储存温度−20°C

应用

该酶还与其他蛋白酶一起被用于分解人类肿瘤、小鼠肾脏、人脑和肺上皮组织。它还在在肝、肾灌注研究、胰腺消化、非实质大鼠肝细胞和肝细胞分离等方面有应用价值。Sigma的该酶用于牛小梁和皮质骨I型胶原的消化。它也被用作B 链球菌 细胞FALGPA检测的阳性对照。

生化/生理作用

从组织中有效释放细胞需要胶原酶和中性蛋白酶的共同作用。每摩尔胶原酶由4g原子钙(Ca2+) 酶激活。培养滤液被认为含有分子量在68-130 kDa之间的至少7种不同的蛋白酶。最佳pH范围为6.3-8.8。这种酶通常用于消化组织样本中的结缔组织成分,以释放单个细胞。胶原酶治疗会导致一些细胞死亡。通常,消化浓度从0.15 mg/mL不等。为产生令人满意的细胞解离效率并不会造成太多的细胞死亡,其反应时间从15分钟到几个小时不等。最好使用含有钙和BSAKrebs Ringer缓冲液,Zn2+ 是活性必需的。该酶识别序列 -R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-,其中X通常是中性氨基酸。乙二醇双(β-氨基乙基醚)-N,N,N′,N′-四乙酸(EGTA)4;β-巯基乙醇;谷胱甘肽(还原型));巯基乙酸钠;22′-联吡啶;8-羟基喹啉、半胱氨酸具有抑制该酶活性的作用。

每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-NNN′,N′-四乙酸,β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。

注意

所提供产品可在-20℃稳定保存一年。在37℃50℃-20℃保存30天,无明显的FALGPA和蛋白酶活性损失。如果快速冷冻分装液(10 mg/mL)并保存于-20℃,胶原蛋白酶原液活性稳定。反复冻融会破坏溶液。 本品在冰上置放7小时以上可保留100%活性。

单位定义

一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸,5小时,pH7.4,37℃,在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白,产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时,pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分钟水解1.0 μmole BAEE

制备说明

该产品相当于Mandl,I.,等报道的前40%硫酸铵馏分。(Mandl, I., et al., J. Clin.Invest., 32, 1323 (1953).储备溶液制备可在37°C下,将1-2 mg/mL胶原酶溶解于含有TESCA缓冲液(含50mM TES0.36mM氯化钙,pH 7.4.


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