Sigma试剂:药典重组胰蛋白酶,T8802-50MG
属性：
质量水平：200
无菌性：aseptically filled
形式：essentially salt-free, lyophilized powder
specific activity：≥10,000 BAEE units/mg protein
分子量：23.8 kDa
组成：protein, ≥95%
溶解性：hydrochloric acid: soluble 1 mM, clear
异质活性：Chymotrypsin ≤0.1 BTEE units/mg protein
储存温度：−20°C
一般描述：
胰蛋白酶分子有两个结构域：一个与酶活性位点和色氨酸残基有关；另一个与8-苯胺基萘-1-磺酸盐结合有关。
应用：
对于胰蛋白酶消化肽，胰蛋白酶：肽 使用约为 1：100 至 1:20 的比例。从培养表面除去粘附细胞是本产品的一个典型应用。 从其底物中去除细胞所需的胰蛋白酶浓度主要取决于细胞类型和培养物的年龄。 胰蛋白酶也被用于细胞培养期间细胞的再悬浮、蛋白质组学研究中的蛋白质消化和各种凝胶内消化。 其他应用包括：通过基于膜的技术评估结晶，用在确定动力学陷阱的存在会限制蛋白质的折叠速率和产量的一项研究中。
胰蛋白酶可使贴壁细胞从组织培养板上脱落，以用于传代。胰蛋白酶用于研究评估大分子群集对人α-乳清蛋白结构稳定性的影响。 胰蛋白酶也用于研究哈茨木霉分泌组的BN-PAGE分析。
生化/生理作用：
胰蛋白酶切割赖氨酸和精氨酸残基的 C 端肽。 如果酸性残基位于切割位点的任一侧，则该反应的水解速度减慢，并且如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧，则停止水解。 胰蛋白酶活性的最适 pH 为 7-9。 胰蛋白酶还可以起到裂解氨基酸合成衍生物的酯和酰胺键的作用。 将 EDTA 作为螯合剂添加到胰蛋白酶溶液中，用于中和钙离子和镁离子，这些离子遮蔽胰蛋白酶作用的肽键。 去除这些离子会增加酶活性。
丝氨酸蛋白酶抑制剂，包括 DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF 和抑肽酶等，将抑制胰蛋白酶。
单位定义：
在25℃、pH 7.6条件下，使用BAEE作为底物，一单位BAEE每分钟可产生0.001的ΔA253 。反应体积= 3.2 ml（1 cm光程）。
使用 BAEE 作为底物，一个 BAEE 单元，将在 pH 7.6，25℃ 下，每分钟产生 0.001 的 A253。
制备说明：
TPCK处理
分析说明：
E1%/280法测定蛋白
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