Sigma:脱氧核糖核酸酶 I
属性:
质量水平:300
生物来源:bovine pancreas
类型:Type IV
形式:lyophilized powder
specific activity:≥2,000 Kunitz units/mg protein
分子量:~31 kDa
纯化方式:chromatography
组成:Protein, ≥80%
溶解性:0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear, colorless
异质活性:Chymotrypsin ≤0.5%
Protease ≤0.05%
RNase ≤0.02%
运输:wet ice
储存温度:−20°C
应用:
DNAse I可用于切开DNA,作为将标记碱基插入DNA的第一步。来自sigma的该酶已用于处理大鼠的脑组织。该研究表明星形胶质细胞的轴突生长不受少突胶质细胞抑制。在另一项研究中,大肠杆菌的解冻固定样本被来自Sigma的DNAseI以及其他酶进行消化。消化是在进行通透化处理和核酸染色前完成的。
来自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I已用于研究枯草芽孢杆菌中核酸酶的二维酶谱分析。来自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I还用于研究小沟和大沟结合药物和嵌入剂对小沟结合蛋白RecA和脱氧核糖核酸酶I的DNA结合的影响。
用于从蛋白质样品中除去 DNA。
生化/生理作用:
DNase I是一种内切核酸酶,可作用于与嘧啶相邻的磷酸二酯键以产生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。当Mg2+存在时,DNAse I可独立切割DNA的每条链且切割位点是随机的。当Mn2+存在时,两条DNA链都几乎是在同样的位置被切割。最适pH在7-8之间。二价阳离子如Mn2+, Ca2+, Co2+以及Zn2+都是酶的激活剂。5 mM浓度的Ca2+可稳定酶免收蛋白水解酶的消化。来自牛胰腺的DNAse I由四种色谱可区分的组分A,B,C和D组成,它们的摩尔比为4:1:1。仅有少量的D被发现。2-巯基yi醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠(SDS)和肌动蛋白都已知可抑制酶的活性。
单位定义:
一Kunitz单位的酶在以I型或III型DNA作为底物时,在 pH 5.0,37°C的条件下在每mL中每分钟可引起0.001的A260。
外形:
含氯化钙的冻干粉
制备说明:
溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分装保存在−20 °C一周后可能会丢失<10%的活性。同样的溶液保存在2-8 °C则可能丢失约20%的活性。当在pH 5和7之间时,它可在60 °C维持活性最长达五小时,并在68 °C <10分钟内丢失活性。它在乙酸缓冲液(pH 5.0)和tris缓冲液((pH 7.2),1 mg/mL浓度)中以6%/小时的速率丢失活性。
分析说明
蛋白由双缩脲法测定。
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